第422章多分子克隆（2 / 2）

dna分子与载体分子连接是克隆过程中的重要环节之一，方法有：1粘性末端连接。dna片段两端的互补碱基顺序称之为粘性末端，用同一种限制性内切酶消化dna可产生相同的粘性末端。在连接酶的作用下可恢复原样，有些限制性内切酶虽然识别不同顺序，却能产生相同末端。2平头末端连接，用物理方法制备的dna往往是平头末端，有些酶也可产生平头末端。平头dna片段可在某些dna连接酶作用下连接起来，但连接效率不如粘性末端高;3同聚寡核苷酸末端连接。4人工接头分子连接，在平头dna片段末端加上一段人工合成的、具有某一限制性内切酶识别位点的寡核苷酸片段，经限制性内切酶作用后就会产生粘性末端。

连接反应需注意载体dna与dna片段的比率。以λ或s质粒为载体时。形成线性多连体dna分子，载体与dna片段的比率高些为佳。以质粒为载体时。形成环状分子，比率常为1∶1。

最后是引入寄主细胞。

常用两种方法：1转化或转染。方法是将重组质粒dna或噬菌体dna3与氯化钙处理过的宿主细胞混合置于冰上，待dna被吸收后铺在平板培养基上，再根据实验设计使用选择性培养基筛选重组子，通常重组分子的转化效率比非重组dna低，原因是连接效率不高，有许多dna分子无转化能力，而且重组后的dna分子比原载体dna分子大，转化困难。2转导，病毒类侵染宿主菌的过程称为转导，一般转导的效率比转化高。

此时的李安，操控着墨莲人，不断的收集材料，进行着研究。

三级文明，分子克隆有很多的作用！

分子克隆技术是发展起来的不久，它的出现和应用开辟了分子遗传学研究的新领域。打开了人类了解、识别、分离和改造基因，创造新物种的大门。它的成就对于工业、农牧业和医学产生深远影响，并将为解决世界面临的能源、食品和环保三大危机开拓一条新的出路。

利用分子克隆技术已将胰岛素。人、牛和鸡的生长激素、人的干扰素、松弛素、促红细胞生长激素、乙型肝炎病毒抗原和口蹄疫病毒抗原的基因制成工程菌，利用发酵工业进行了大规模生产。还可提高微生物本身所产生的蛋白酶类和抗生素类药物的产量。

通过遗传工程看到癌细胞具有逆转为正常细胞的可能性。例如sv40病毒引起的小鼠肿瘤细胞，在温度高时可逆转为正常细胞。为治疗半乳糖血症，用带有大肠杆菌乳糖操纵子的λ噬菌体去感染半乳糖血症患者的离体培养细胞，发现这种细胞的半乳糖苷酶达到了正常水平，并确实能代谢半乳糖。

通过遗传工程看到癌细胞具有逆转为正常细胞的可能性，例如sv40病毒引起的小鼠肿瘤细胞，在温度高时可逆转为正常细胞。为治疗半乳糖血症，用带有大肠杆菌乳糖操纵子的λ噬菌体去感染半乳糖血症患者的离体培养细胞。发现这种细胞的半乳糖苷酶达到了正常水平，并确实能代谢半乳糖。

植物遗传工程对提高农作物的产量、培育新的农作物品种提供了可能。有许多外源基因导入植物获得成功。

一个有关于李安的躯体正在不断的形成。。

“这是一个多顺反子，在这里，在这里！为了自己的身体变得完美！”

既然是建造自己的身体，李安尽量让自己变得完美。

在原核细胞中，通常是几种不同的连在一起，相互之间由一段短的不编码蛋白质的间隔序列所隔开，这种叫做多顺反子。顺反子的概念来自遗传学中的顺反重组试验，是确定交换片段究竟在一个基因内还是属于两个基因的试验，简言之。一个顺反子就是一个基因，多顺反子就是多个基因。真核生物中也有多顺反子，比如c。elegans共有13500个基因。约25%的是多顺反子。

存在于原核和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器如线粒体和叶绿体中。a病毒和a噬菌体中的a既是遗传信息的载体又具有的功能。生物体种类的多少与生物进化水平有关，高等生物所含的遗传信息多，的种类也多。生物体内某种的含量根据需要而有不同，如5龄蚕后部丝腺体的主要任务是快速合成大量丝心蛋白，因而编码丝心蛋白的含量特别多。有些细菌需要不断多顺反子适应外部环境，其体内编码某些诱导酶的的含量也较多。

原核和真核生物有不同的特点：1原核生物常以多顺反子见的形式存在，即一条链编码几种功能相关联的蛋白质。真核生物一般以单顺反子的形式存在，即一种只编码一种蛋白质。2原核生物的转录与翻译一般是偶联的，即转录尚未完毕。蛋白质的转译合成就已开始。真核生物转录的前体则需经后加工，加工为成熟的与蛋白质结合生成信息体后才开始。工作信息体中蛋白质与a之比约为3。3原核生物半寿期很短，一般为几分钟。最长只有数小时a噬菌体中的a除外。真核生物的半寿期较长，如胚胎中的可达数日。4原核与真核生物的结构特点也不同。

一级结构与功能的关系：原核生物一般5端有一段不翻译区，称前导顺序，3端有一段不翻译区，中间是蛋白质的编码区，一般编码几种蛋白质。如大肠杆菌乳糖操纵子编码3条多肽链;色氨酸操纵子编码5条多肽链。也有单顺反子形式的细菌，如大肠杆菌脂蛋白。原核生物分子中一般没有修饰核苷酸，也没有5端帽子结构和3端聚腺苷酸尾巴。在原核生物的起始密码子aug附近5方向上游的一小段长短不等的顺序，含有较多的嘌呤核苷酸，被称为sd顺序。未完待续

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